酶聯免疫吸附試驗影響標本處理因素和注意事項
標本處理因素
實驗室人員收到標本后應認真查對,對不符合要求的標本和申請單要拘收,合格標本要及時分離血清,避免溶血,提取血清時不應混有大量纖維蛋白或細胞成分。對不能及時檢測的標本要妥善保存于4℃冰箱,做好原始記錄,標本管上標上待檢者姓名、日期。ELISA試劑盒進口大鼠從冰箱取出的標本要預溫至室溫,對冰凍的樣品要融化好,并充分混勻再用。
注意事項
1、操作前應對實驗的物理參數有充分的了解,如環境溫度(保持在18 C~25℃)、反應孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數等,要先查看水育箱溫度,是否符合要求。
2、正確使用加樣器加樣器應垂直加入標本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次序要與說明書一致,否則可導致結果錯誤,實驗重復性差。
3、手工洗板加洗液時沖擊力不要太大,洗滌次數不要超過說明書推薦的洗滌次數,洗液在反應孔內滯留的時間不宜太長。不要使洗液在孔間竄流,造成孔問污染,導致假陰性或假陽性。
4、ELISA試劑盒進口大鼠要保證加液量一致 我們在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量不準,造成顯色不統一,判斷錯誤。
5、顯色液量不可過多 加樣的工作環境不能處于陽光直射的環境下,加顯色系統后要避光反應,顯色液量不能過多,以免顯色過強。
6、試劑的影響因數:應選用有國家批準文號,質量靠得住的產品,不能圖便宜,忽視質量保證。試劑應妥善保存于4℃冰箱內,在使用時先平衡至室溫,不同批號的試劑組分不宜交叉使用。試劑開啟后要在一周內用完,剩余的試劑下次用時應先檢查是否變質,,顯色劑如被污染變色將造成全部顯色,導致錯誤結果。過期的試劑不宜再用,若別無選擇,ELISA試劑盒進口大鼠應做好雙份質控品的監測,確保結果的可靠性。