ELISA試劑盒SCI文章實驗中的封閉液小知識
ELISA的試劑盒說明上寫封閉液用蔗糖溶液,一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封閉空白位點,蔗糖封閉的原理:
1、ELISA實驗中,蔗糖本身沒有封閉作用;
2、封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。
3、加蔗糖的主要目的是保護ELISA板子吸附(包被)的蛋白,起到“保護劑”的作用。
4、蔗糖溶液一般在ELISA板子經過BSA封閉后加,當然也有將蔗糖加到封閉液中同時進行處理;那一種更好需要你實驗后來驗證。但多數選擇前者。
封閉劑還可用5%的脫脂乳(市售即可),0.4%的明膠,但是實驗表明前者比較好,后者不容易洗干凈未結合上的明膠。
封閉劑的原理就是與酶聯板上未結合抗原或抗體的微孔中用封閉劑封閉上,結合抗體或抗原的時候就不會產生非特異結合了,不會影響實驗的準確度。
tween的作用:雖然不能單獨封閉,但和BSA在封閉時會起到清洗非特異性結合或結合不牢固的蛋白的作用,假如抗體包被在板上會出現YY-
附件:ELISA試劑盒實驗中緩沖溶液等試劑的配置
為了保證ELISA試劑盒SCI文章實驗的準確性,實驗操作中加入的緩沖液和各組分一定要,將洗滌液加入酶標板中的時候防止加入的試劑混入另外一個酶標孔,嚴防交叉污染。
Meprednisone 200mg 甲潑尼松標準品 1247-42-3
Biperiden Hydrochloride 200mg 鹽酸比哌立登標準品 1235-82-1
Methdilazine Hydrochloride 200mg 鹽酸甲吡吩嗪標準品 1229-35-2
Protriptyline Hydrochloride 200mg 鹽酸普羅替林標準品 1225-55-4
Ipodate Sodium 200mg 碘泊酸鈉標準品 1221-56-3
Sulfadimethoxine 200mg 磺胺二甲氧嗪標準品 122-11-2
Gemcitabine Hydrochloride 200mg 鹽酸吉西他濱標準品 122111-03-9
Loracarbef 200mg 氯碳頭孢標準品 121961-22-6
Propyl Gallate 200mg 沒食子酸丙酯標準品 121-79-9
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