使用PCR檢測試劑盒時需要注意哪些要點?
PCR檢測試劑盒用于檢測疑似感染動物的血清或組織中的CSFV,適用于CSFV的檢測、診斷和流行病學調查。該試劑盒不能用于區分強弱毒。
PCR檢測試劑盒需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機、PCR擴增儀、電泳儀、電泳槽、紫外凝膠成像儀(或紫外分析儀)、微波爐、組織研磨器、-20°C冰箱、可調移液器(2H兒、204、200凡、1000風)。
2.耗材:眼科剪、眼科鑷、稱量紙、20mL-次性注射器、生理鹽水、瓊脂糖、500mL量簡、500mL錐形瓶、經焦碳酸二乙酯(DEPC)水處理的滅菌1.5mL離心管和吸頭(10風、200HL、1000兒)、滅菌雙蒸水。
PCR檢測試劑盒的使用注意事項:
1.所有接觸病料的物品均應合理處理,以免污染實驗室。
2.PCR整個試驗分配液區、模板提取區、擴增區、電泳區。流程順序為配液區模板提取區擴增區電泳區。嚴禁器材和試劑倒流。
3.所有試劑應在規定的溫度儲存,-20"C保存的各試劑使用前應放于室溫*融化,使用后立即放回-20°C。
4.染色液低毒,應于室溫條件避光保存,操作時應戴上手套。
5.注意防止試劑盒組分受污染。使用前將紅蓋管8000rpm離心15s,使液休全部沉于管底,放于冰盒中,吸收液體時移液器吸頭盡較在液體表面層吸取。
6.不要使用超過有效期限的試劑,試劑盒之間的成分不要混用。
7.在RNA提取過程中,避免RNA酶污染,盡量縮短操作時間。
8.嚴格遵守操作說明可以獲得較好的結果。操作過程中移液、定時等全部過程必須準確。
9.反復凍融試劑將減低檢測靈敏度兒建議在3次內用完,請嚴格按試劑金說明書操作。