很多同學養細胞的手藝,都是從師兄師姐那里「傳承」來的,由于沒有辦法做到絕對的無菌,所以從經驗角度出發,前輩們都會告訴剛開始養細胞的同學,可以在配制培養基的時候,加入1%左右的雙抗,防止細胞出現細菌污染(有些時候甚至出現離開抗生素,細胞沒過幾天立馬就被污染的情況)。
這就造成一些小伙伴在培養基中「預防性添加抗生素」,其實圖的就是個心安,抱著「有了抗生素就不怕污染」的心態。但事實上,抗生素并不是「免死金牌」,真菌、支原體這些污染是它不能夠對抗的,甚至濫用還會適得其反。
這抗生素對細胞有什么影響呢?
早在十幾年前,就有很多報導指出β-內酰胺類抗生素及氨基糖甙類抗生素,對真核細胞培養有抑制增殖作用[1]。并且這種抑制增殖作用在原代細胞和干細胞等難養細胞上尤其明顯[2-3]。2017年,加州大學Nadav Ahituv博士在Scientific Reports上發表文章,呼吁在細胞培養過程中減少抗生素的使用[4]。他們發現抗生素(雙抗:青霉素和鏈霉素)的使用影響人體肝細胞中基因表達與基因調控。其中有209個基因的表達發生了改變,特別是與藥物和應激反應相關的基因。超過9,500個基因調控元件發生了變化,并且很多調節元件位于參與細胞分化,核酸酶活性和tRNA修飾的基因附近。雖然這些基因的數量在龐大的細胞基因庫中不值一提,但這絕對不是一個應該被忽略的事件。
雖然抗生素對真核細胞生長的影響機制至今尚未明確,但是為了細胞更好的生長,實驗結果更加準確,實驗數據更加穩定,在實驗過程中盡量不要隨意使用。