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ELISA試劑盒進口大鼠以 HRP標記
更新時間:2017-11-01   點擊次數:855次

ELISA試劑盒進口大鼠以 HRP標記的鏈霉親和素復合物(HRP Streptavidin Conjugate,
HRP-SA)為基礎,可用于檢測血液,細胞、組織
CD40抗原。該試劑盒
、特異性強、定性定位    、背景清晰。在所用的 CD40一抗與相
,用生物化二抗與一抗特異性    ,zui后加   HRP-SA,形成抗
應靶抗原
原—特異一抗—生物素化二抗—HRP-SA復合物,顯微鏡下觀察成像。 
試劑盒所含試劑:
試劑A 通透液:0.1% Triton-X 100   10 mL(選用) 
試劑B 封閉
試劑C (*分裝)已稀釋的即用型CD40一抗(2.5ml) 
試劑D (*分裝)生物素化       IgG 1支 
(濃度1.5 mg/mL,稀釋     1:300~1:500)50 μL+抗體稀釋液20ml 
(封閉用) 20 mL 
試劑E HRP-SA復合物1支(濃度1 μM,稀釋     1:50~1:200)100 μL 
試劑F DAB顯色液 5ml 
用戶自備試劑:
1. 10mM TBS(pH7.2~7.4) 
加蒸餾  800mL,濃鹽酸調pH值至7.2~7.4,zui后定容至1000mL 
TBS-T:TBS+Tween 20(0.05%體積  ) 
2.抗原修復液(依檢測抗原不同而選擇不同的修復液) 
10mM pH6.0 檸檬酸
檸檬酸0.38g 
檸檬酸三鈉2.45g 
加蒸餾  900mL,濃鹽酸調pH值至6.0,該試劑盒以 HRP標記zui后定容至1000mL 
或:0.5M EDTA修復液(pH8.0) 
EDTA·2H2O 186.1g 
加蒸餾  700mL,用10mM NaOH調pH值至8.0,zui后定容至1000Ml 
3. 10 mL 
4. Tween 20 5 mL 
石蠟包埋組織切片
實驗步驟(建議方案):
石蠟包埋組織切片3~4μm 厚度 
1.烤片: 將待做切片
,于60℃恒溫烤箱中至少烤1 hr; 
3次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次
2.脫蠟: 切片放10 min; 
3.    : 切片經下行酒精    ,無乙醇2 min;75%乙醇2min,自來5min,95%乙醇2次(每次2min),85%,ddH2O洗2×2min; 
4.抗原修復: 根據抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫
度達到98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然    ,自來
2min,TBS洗滌(2×2min)。 
5.封閉: 滴加試劑B,37℃濕盒孵育30 min; ,ddH2O洗2×
1)* 注:有些抗原勿需修復,直接進
6.加一抗:滴加用試劑C(即用型一抗),37℃濕盒孵育2 hr 或4℃過夜; 
7.洗滌: TBS-T洗滌(3×5 min); 
8.封閉: 滴加試劑B,37℃濕盒孵育10 min; 
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑D),37℃濕盒中孵育30 min; 
10.洗滌: TBS-T洗滌(3×5 min); 
11.封閉: 滴加試劑Tween 20,37℃濕盒孵育封閉20 min; 
12.加HRP-SA: 滴加用試劑C稀釋的試劑E(1:50~200,終濃度5~20 nM),37
℃濕盒中孵育30 min; 
13.洗滌: TBS-T洗滌(3×5 min),該試劑盒以 HRP標記TBS洗滌(2×5 min); 
14.顯色:應用DAB溶液(試劑F)顯色; 
15.復染:自來,復染,脫  ,透明; 
16.ELISA試劑盒進口大鼠封片: 待組織標本干后,用試劑封片; 
亞油酸甲酯標準品    112-63-0     5×50mg    Methyl Linoleate 
亞油酯酰聚氧甘油酯標準品        100mg    Linoleoyl Polyoxylglycerides
亞洲人參提取物粉標準品    50647-08-0     1.5g    Powdered Asian Ginseng Extract 
煙酸標準品    59-67-6    200mg    Niacin
煙酰胺標準品    98-92-0     500mg    Niacinamide (Vitamin B3)
延胡索酸泰妙菌素標準品    55297-96-6     250mg    Tiamulin Fumarate 
鹽酸阿的平標準品    6151-30-0     200mg    Quinacrine Hydrochloride 
鹽酸阿法羅定標準品    561-78-4    250mg    Alphaprodine Hydrochloride CII
鹽酸阿夫唑嗪標準品    81403-68-1    150mg    Alfuzosin Hydrochloride
鹽酸阿可樂定標準品    73218-79-8    100mg    Apraclonidine Hydrochloride
鹽酸阿米洛利標準品    17440-83-4    500mg    Amiloride Hydrochloride
ELISA試劑盒進口大鼠

 

 

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